उपन्यास कोरोनावायरस (2019-nCoV) न्यूक्लिक एसिड का पता लगाने किट (प्रतिदीप्ति आरटी-पीसीआर)

इरादा उपयोग

किट एक है TaqMan जांच वास्तविक समय फ्लोरोसेंट पीसीआर गुणात्मक रूप से ORF1ab का पता लगाने के लिए, n जीन न्यूक्लिक एसिड 2019-nCoV गले में खराश के साथ, संदिग्ध निमोनिया के लक्षणों और क्लस्टरिंग वाले रोगियों में बलगम

परीक्षण के परिणाम केवल नैदानिक ​​संदर्भ के लिए हैं और नहीं कर सकते हैं नैदानिक ​​के लिए केवल बेंचमार्क माना जाता है। diagn.it का नैदानिक ​​लक्षणों और अन्य प्रयोगशाला के संबंध में प्रकट विश्लेषण करने की सिफारिश की गई। परिणाम

ऑपरेटरों को चाहिए जीन प्रवर्धन या आणविक जीव विज्ञान विधि परीक्षण में पेशेवर प्रशिक्षण का अनुभव है, और प्रयोगशाला के लिए प्रासंगिक योग्यता है। संचालन प्रयोगशाला चाहिए उचित जैविक सुरक्षा सावधानियों और सुरक्षात्मक प्रक्रियाओं

परीक्षण सिद्धांत

इस किट में, प्राइमर और जांच को क्रमशः 2019-nCoV; के ORF1ab के संरक्षित और विशिष्ट क्षेत्रों के लिए डिज़ाइन किया गया है। फ्लोरोसेंट पीसीआर का उपयोग वायरल rna का पता लगाने के लिए किया जाता है न्यूक्लिक नमूना का एसिड शुद्धि आरएनए

यह परीक्षण किट का उपयोग करता है वास्तविक समय फ्लोरोसेंट PCR प्रौद्योगिकी। इलाज पीसीआर प्रवर्धन, जांच टेम्पलेट को बांधता है, और 5'-अंत जांच समूह के रिपोर्टर द्वारा cleaved है। Taq एंजाइम (5 '→ 3' एक्सोन्यूक्लीज गतिविधि), जिससे दूर चल रहा है एक फ्लोरोसेंट उत्पन्न करने के लिए शमन समूह संकेत वास्तविक समय प्रवर्धन वक्र स्वचालित रूप से पता लगाया प्रतिदीप्ति संकेत के आधार पर प्लॉट किया जाता है, और नमूना सीटी मान है। गणना की गई है (अनुभवी चक्रों की संख्या जब प्रत्येक प्रतिक्रिया ट्यूब में प्रतिदीप्ति संकेत बसे तक पहुँचता है। थ्रेसहोल्ड)। FAM , VIC और टेक्सास लाल फ्लोरोफोर्स हैं उदारीकृत to mark ORF1ab जीन, प्रतिक्रिया में एन जीन जांच समाधान एक परीक्षण का उपयोग करके, उपर्युक्त दो जीनों की गुणात्मक पहचान 2019-nCoV एक साथ किया जा सकता है

को झूठे नकारात्मक परिणाम से बचने के लिए, किट को आंतरिक नियंत्रण (आईसी) के साथ प्रदान किया जाता है, जिसे Cy5 फ्लोरोसेंट समूह जो कर सकता है निष्कर्षण प्रक्रिया और प्रतिक्रिया की निगरानी के लिए उपयोग किया जाता है समाधान

प्रमुख तत्व

ध्यान दें ¹ : विभिन्न घटकों के विभिन्न हो विमर्श किया

ध्यान दें ^२ : परीक्षण किट होते हैं न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण अभिकर्मक, पहले अभिकर्मक तैयार करें। उपयोग

1. नमूना संभालना

जोड़ें 10μL आंतरिक नियंत्रण में 200μL सकारात्मक नियंत्रण और ऋणात्मक नियंत्रण, क्रमशः प्रदर्शन करने के लिए न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण

2. अभिकर्मक तैयारी:

प्रणाली तैयारी: लेना पूर्व-स्थापित न्यूक्लिक एसिड प्रवर्धन lyophilizer, पन्नी थैली खोलने के द्वारा और यह अपकेंद्रित्र तुरंत प्रत्येक परीक्षण की नमूना राशि चाहिए एक सकारात्मक नियंत्रण और एक नकारात्मक युक्त 8 के गुणकों हो। control.add 35μL न्यूक्लियस-फ्री पानी पर प्रत्येक प्रतिक्रिया ट्यूब

3. नमूना लोड हो रहा है:

जोड़ें 5μL नमूना न्यूक्लिक एसिड का परीक्षण, सकारात्मक नियंत्रण, नकारात्मक नियंत्रण जो कि पूरी प्रतिक्रिया मात्रा 40 है μL आवंटित प्रतिक्रिया में solution.for यह एक ठीक मिश्रण की आवश्यकता है, और बस के ढक्कन को बंद करें PCR प्रतिक्रिया ट्यूब, ट्यूब की दीवार में तरल अपकेंद्रित्र ट्यूब के नीचे, इस प्रकार प्रक्रिया PCR प्रवर्धन

सत्यापन के बाद, यह अनुमान लगाया गया कि 5μL-10μL आयल तेल पीसीआर सिस्टम प्रभावित नहीं होगा पीसीआर परिणाम लेकिन संदूषण और तरल से बचें वाष्पीकरण